طراحی و ساخت یک پلاسمید عرضه سطحی حاوی قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 نوترکیب ویروس پاپیلومای انسانی تیپ 18 جهت بیان در مخمر Yarrowia lipolytica | ||
| مجله زنان، مامایی و نازایی ایران | ||
| دوره 25، شماره 8، آبان 1401، صفحه 68-80 اصل مقاله (786.16 K) | ||
| نوع مقاله: اصیل پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22038/ijogi.2022.21201 | ||
| نویسندگان | ||
| محدثه کوهی چاپان1؛ دکتر سولماز منیری جواد حصاری* 2؛ دکتر فرشاد درویشی هرزویلی3؛ دکتر کاترین مادزاک4 | ||
| 1کارشناس ارشد زیستشناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران. | ||
| 2استادیار گروه زیستشناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران. | ||
| 3استاد گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه الزهراء، تهران، ایران. | ||
| 4محقق بالارتبه، انستیتو تحقیقات ملی کشاورزی، غذا و محیط، دانشگاه Prais-Saclay، پاریس، فرانسه. | ||
| چکیده | ||
| مقدمه: ویروس های پاپیلومای انسانی (HPV) با بیش از 100 تیپ، به دو دسته با ریسک پایین و بالا تقسیم می شوند که تیپ های 16 و 18 بهتنهایی در 70% موارد سرطان گردنه رحم دخیل اند. در حال حاضر، توسعه پروتئین های نوترکیب HPV با هدف واکسیناسیون یا درمان مورد توجه دانشمندان میباشد. از این رو، مطالعه حاضر با هدف ساخت یک پلاسمید نوترکیب عرضهکننده در سطح رمزگذار پروتئین E6 ویروس پاپیلومای انسانی تیپ 18 انجام شد. روشکار: قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 تیپ 18 ویروس پاپیلومای انسانی (HPV18) با استفاده از DNA فرد مبتلا به ویروس بهعنوان الگو، با روش PCR آشیانه ای مورد تکثیر قرار گرفت و پس از برش آنزیمی دوگانه Hind III و SfiI، به درون پلاسمید عرضه کننده در سطح pINA1317-YLCWP110 همسانه سازی شد. یافته ها: روش های مولکولی نظیر PCR و برش آنزیمی دوگانه صحت همسانه سازی پلاسمید نوترکیب pINA1317-YLCWP110-E6 را مورد تأیید قرار داد. همچنین، نتایج بهدست آمده از تعیین توالی بهروش سنگر و همردیفی با داده های موجود در بانک ژن منجر به تأیید نهایی صحت توالی، ترادف و چارچوب قرار گرفتن قطعه ژنی در جایگاه مناسب گردید. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه، همسانه سازی موفق قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 ویروس HPV18 را در پلاسمید عرضه کننده در سطح pINA1317-YLCWP110-E6 در جایگاه و جهت مناسب مورد تأیید قرار داد. این پلاسمید در صورت بیان در میزبان مخمری Yarrowia lipolytica، قابلیت استفاده بهعنوان واکسن، مارکر مولکولی یا جنبه درمانی خواهد داشت. | ||
| کلیدواژهها | ||
| پروتئین E6 نوترکیب؛ پلاسمید عرضهکننده در سطح؛ تیپ 18؛ ویروس پاپیلومای انسانی؛ همسانه سازی | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 848 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 567 |
||
| تعداد نشریات | 29 |
| تعداد شمارهها | 2,327 |
| تعداد مقالات | 24,917 |
| تعداد مشاهده مقاله | 83,314,750 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 46,246,345 |